标签归档：Megazyme活性酶

Megazyme E-FRMXPD 果聚糖酶混合物

发表于由

Megazyme E-FRMXPD 果聚糖酶混合物

Product code: E-FRMXPD
20,000 Units

Content: 20,000 Units
Shipping Temperature: Ambient
Storage Temperature: Below -10oC
Formulation: Supplied as a lyophilised powder
Physical Form: Powder
Stability: Minimum 1 year at < -10oC. Check vial for details.
Enzyme Activity: Fructanase
EC Number: endo-Inulinase: 3.2.1.7,
exo-Inulinase: 3.2.1.80
CAZy Family: GH32
CAS Number: 9001-57-4,
9025-67-6,
37288-56-5
Synonyms: endo-inulinase: 1-beta-D-fructan fructanohydrolase
exo-inulinase: fructan β-fructosidase
Source: Aspergillus sp.
Expression: From Aspergillus sp.
Specificity: endo-Inulinase: endo-acting hydrolysis of (2,1)-β-D-fructosidic linkages in inulin.
exo-Inulinase: Hydrolysis of terminal, non-reducing β-D-fructofuranoside residues in β-D-fructofuranosides.
Unit Definition: endo-Inulinase: One Unit of endo-inulinase activity is defined as the amount of enzyme required to release one μmole of β-D-fructose reducing-sugar equivalents per minute from inulin (20 mg/mL) in sodium acetate buffer (100 mM), pH 4.5.
exo-Inulinase: One Unit of exo-inulinase activity is defined as the amount of enzyme required to release one μmole of β-D-fructose reducing-sugar equivalents per minute from kestose (5 mg/mL) in sodium acetate buffer (100 mM), at pH 4.5 at 40oC.
Temperature Optima: 40oC
pH Optima: 4.5
Method recognition: AOAC Method 997.08, AOAC Method 2000.11, AOAC Method 2016.06, GB Standard 5009.245-2016 and GB Standard 5009.255-2016

Powder (freeze dried)

Fructanase, Amyloglucosidase (E-AMGDF) and Isoamylase (E-ISAMY) are used in the enzyme hydrolysis step of two validated methods for the determination of polydextrose (a low molar mass dietary fiber) in foods: AOAC method 2000.11 and Chinese GB Standard 5009.245-2016.

Components: exo-inulinase 20,000 U (on kestose, at 40oC), endo-inulinase 1000 U (on fructan at 40oC), α-galactosidase 0.70 U (on p-nitrophenyl α-galactoside at 40oC), β-Glucanase 1.25 U (on β-glucan at 40oC) and pectinase 5.5 U (on pectin at 40oC).

Note: This product has been purified to remove α-galactosidase, β-glucanase and pectinase which interfere with the use of the preparation in the measurement of fructan (AOAC Method 997.08) and in the measurement of Polydextrose (AOAC Method 2000.11).

Fructanase and sucrase (E-SUCR) are used in the enzyme hydrolysis step of the AOAC method 2016.06 and the Chinese GB Standard 5009.255-2016 for the determination of fructan in foods.

See more of our other Carbohydrate Active enZYmes products.

Validation of Methods

内容：20,000个单位
运输温度：环境
储存温度：-10oC以下
配方：以冻干粉形式提供
物理形态：粉末
稳定性：在 < -10oC 时至少 1 年。检查小瓶了解详情。
酶活性：果聚糖酶
EC编号：菊粉内切酶：3.2.1.7，
外切菊糖酶：3.2.1.80
CAZy 家族：GH32
CAS 编号：9001-57-4，
9025-67-6,
37288-56-5
同义词：菊粉内切酶：1-β-D-果聚糖果糖水解酶
外切菊糖酶：果聚糖β-果糖苷酶
来源：曲霉属。
表达：来自Aspergillus sp。
特异性：菊粉内切酶：菊粉中 (2,1)-β-D-果糖苷键的内切作用水解。
外切菊糖酶：水解 β-D-呋喃果糖苷中末端的非还原性 β-D-呋喃果糖苷残基。
单位定义：菊粉内切酶：一个菊糖内切酶活性单位定义为在乙酸钠缓冲液中每分钟从菊粉 (20 mg/mL) 中释放 1 μmole β-D-果糖还原糖当量所需的酶量(100 毫米), pH 值 4.5。
外切菊糖酶：一单位外切菊糖酶活性定义为在乙酸钠缓冲液（100 mM）中每分钟从酮糖 (5 mg/mL) 中释放 1 μmole β-D-果糖还原糖当量所需的酶量)，在 40oC 时 pH 值 4.5。
最佳温度：40oC
最佳 pH 值：4.5
方法识别：AOAC Method 997.08、AOAC Method 2000.11、AOAC Method 2016.06、GB Standard 5009.245-2016和GB Standard 5009.255-2016
粉末（冻干）

果聚糖酶、淀粉葡萄糖苷酶 (E-AMGDF) 和异淀粉酶 (E-ISAMY) 用于两种经过验证的食品中聚葡萄糖（一种低摩尔质量膳食纤维）测定方法的酶水解步骤：AOAC 方法 2000.11 和中国 GB 标准 5009.245 -2016 年。

成分：菊糖外切酶 20,000 U（在 40oC 条件下对 kestose），菊粉内切酶 1000 U（在 40oC 条件下对果聚糖），α-半乳糖苷酶 0.70 U（在 40oC 条件下对硝基苯基α-半乳糖苷），β-葡聚糖酶 1.25 U（ β-葡聚糖，40oC）和果胶酶 5.5 U（果胶，40oC）。

注意：本产品已经过纯化，去除了干扰制剂在果聚糖测定（AOAC 方法 997.08）和聚葡萄糖测定（AOAC 方法 2000.11）中使用的 α-半乳糖苷酶、β-葡聚糖酶和果胶酶。

果聚糖酶和蔗糖酶 (E-SUCR) 用于 AOAC 方法 2016.06 和中国 GB 标准 5009.255-2016 测定食品中果聚糖的酶解步骤。

查看更多我们的其他碳水化合物活性酶产品。

Related products  相关产品：
Similar Products
E-FRMXLQ – Fructanase Mixture (liquid)
E-EXOIAN – exo-Inulinase (Aspergillus niger)
E-ENDOIAN – endo-Inulinase (Aspergillus niger)

Related Carbohydrates
P-INUL – Inulin
P-FOS28 – Fructooligosaccharides (FOS)
O-KTR – 1-Kestose
O-KTE – 1,1-Kestotetraose
O-KPE – 1,1,1-Kestopentaose

Colourimetric Substrates
S-AZFR5 – Azo-Fructan
S-AZFRXOI – Azo-Fructan

Associated Enzymes
E-INVPD-2G – Invertase
E-ENLEV – endo-Levanase (Bacteroides thetaiotaomicron)
E-SUCR – Sucrase (from yeast)
E-INVRT – Invertase (fructofuranosidase) (yeast)

Megazyme endo-1,5-α-Arabinanase (Aspergillus niger)

发表于由

Megazyme endo-1,5-α-Arabinanase (Aspergillus niger)

上海金畔生物代理Megazyme品牌产品，我们将竭诚为您服务，欢迎访问Megazyme官网或者咨询我们获取更多相关Megazyme品牌产品信息。

内切-1,5- α – 阿拉伯聚糖（黑曲霉）
英文名：endo-1,5-α-Arabinanase (Aspergillus niger)
货号：E-EARAB
规格：400 Units
品牌： Megazyme

Content: 400 Units
Shipping Temperature: Ambient
Storage Temperature: 2-8oC
Formulation: In 3.2 M ammonium sulphate
Physical Form: Suspension
Stability: Minimum 1 year at 4oC. Check vial for details.
Enzyme Activity: endo-Arabinanase
EC Number: 3.2.1.99
CAZy Family: GH43
CAS Number: 75432-96-1
Synonyms: arabinan endo-1,5-alpha-L-arabinanase; 5-alpha-L-arabinan 5-alpha-L-arabinanohydrolase
Source: Aspergillus niger
Molecular Weight: 39,750
Concentration: Supplied at ~ 200 U/mL
Expression: From Aspergillus niger
Specificity: endo-hydrolysis of (1,5)-α-arabinofuranose linkages in (1,5)-α-arabinans. Acts more slowly on the (1,5)-α-linked arabinan backbone in branched arabinans than on linear arabinans.
Specific Activity: ~ 10 U/mg (40oC, pH 4.0 on CM-linear 1,5-α-L-arabinan)
Unit Definition: One Unit of arabinanase activity is defined as the amount of enzyme required to release one µmole of arabinose reducing-sugar equivalents per minute from CM-linear 1,5-α-L-arabinan (10 mg/mL) in sodium acetate buffer (100 mM), pH 4.0 at 40oC.
Temperature Optima: 40oC
pH Optima: 4
Application examples: Applications established in food and beverage industries, particularly in the reduction of haze in fruit juices and the processing of sugar beet.

 

Megazyme 淀粉酶系列产品

发表于由

Megazyme 淀粉酶系列产品

Amylase

Alpha淀粉酶[猪胰腺]

英文名：α-Amylase (Porcine Pancreatic)

货号：E-PANAA-3G

规格：3g

麦芽淀粉酶标准液

英文名：Malt Amylase Standard

货号：E-MAST

规格：100 mL; α-amylase 950 U/mL;

异淀粉酶的HP（糖原果胶6-葡聚糖水解酶）

英文名： Isoamylase HP (Glycogen 6-glucanohydrolase)

货号：E-ISAMYHP

规格：200 Units

Alpha淀粉酶[猪胰腺]

英文名： α-Amylase (Porcine Pancreatic)

货号：E-PANAA-9G

规格：9g

异支链淀粉酶（黑曲霉）

英文名：Isopullulanase (Aspergillus niger)

货号：E-ISPUAN

规格：2,000 Units at 40°C

α-淀粉酶（解淀粉芽孢杆菌）

英文名：α-Amylase (Bacillus amyloliquefaciens)

货号：E-BAASS

规格：2900 Units

Alpha淀粉酶[米曲霉]

英文名：α-Amylase (Aspergillus oryzae)

货号：E-ANAAM

规格：20000 Units

极限糊精酶和支链淀粉酶检测片剂 (200)

英文名：Limit-Dextrizyme – 200 Tablets

货号：T-LDZ-200T

规格：200 Tablets

极限糊精酶和支链淀粉酶检测片剂 (1000)

英文名：Limit-Dextrizyme – 1000 Tablets

货号：T-LDZ-1000T

规格：1000 Tablets

Alpha淀粉酶高灵敏度检测底物

英文名：Amylazyme Red – 200 Tablets

货号：T-AMZRD-200T

规格：200 Tablets

Alpha淀粉酶高灵敏度检测底物

英文名：Amylazyme Red – 1000 Tablets

货号：T-AMZRD-1000T

规格：1000 Tablets

大麦粉提取物中Alpha淀粉酶检测片剂 (200)

英文名：Amylazyme BG – 200 Tablets

货号：T-AMZBG-200T

规格：200 Tablets

Alpha淀粉酶检测底物

英文名：Amylazyme – 200 Tablets

货号：T-AMZ-200T

规格：200

Alpha淀粉酶检测底物

英文名：Amylazyme – 1000 Tablets

货号：T-AMZ-1000T

规格：1000 Tablets

Alpha淀粉酶活性检测底物

英文名：Red Starch – 5g

货号：S-RSTAR

规格：5 grams

Megazyme 酶活性检测试剂盒产品目录

发表于由

Megazyme 酶活性检测试剂盒产品目录

Browse our assay kits for the measurement of enzyme activities.

α-Amylase Assay Kit (Ceralpha Method) 100 / 200 assays per kit K-CERA α-淀粉酶试剂盒(Ceralpha法)
α-Amylase SD Assay Kit (High Sensitivity Method) 160 / 320 assays (manual) / 640 assays (auto-analyser) K-AMYLSD α-淀粉酶SD试剂盒(高灵敏度法)
β-Amylase Assay (Betamyl-3) 100 / 200 assays per kit K-BETA3 β-淀粉酶法(β-3)
Catalase Assay Kit 100 / 200 assays per kit K-CATAL 过氧化氢酶试剂盒
Cellulase Assay Kit (CellG5 Method) Multiple pack sizes available K-CellG5 纤维素酶试剂盒(CellG 5法)
Cellulase Assay Kit (CellG3 Method) 180 / 360 assays per kit / 720 (auto-analyser) K-CellG3 纤维素酶试剂盒(CellG 3法)
Malt β-Glucanase/Lichenase Assay Kit (MBG4 Method) 100 assays (manual) / 400 assays (auto-analyser) K-MBG4 麦芽β-葡聚糖酶/地衣酶试剂盒(MBG 4法)
β-Glucanase Assay Kit (Malt and Microbial) 100 assays per kit K-MBGL β-葡聚糖酶试剂盒(麦芽和微生物)
Glucose Oxidase Assay Kit 200 assays (manual) / 2000 assays (microplate) / 1960 assays (auto-analyser) K-GLOX 葡萄糖氧化酶试剂盒
α-Glucuronidase Assay Kit 50 assays (manual) / 200 assays (microplate) K-AGLUA α-葡萄糖醛酸酶试剂盒
Malt Amylase Assay Kit 100 assays (50 of each) per kit K-MALTA 麦芽淀粉酶试剂盒
Pullulanase/Limit-Dextrinase Assay Kit (PullG6 Method) 100 / 200 assays per kit K-PullG6 普鲁兰酶/极限-葡聚糖酶试剂盒(PullG6法)
endo-Xylanase Assay Kit (XylX6 Method) Multiple pack sizes available K-XylX6 内切木聚糖酶试剂盒(XylX6法)
Xylanase Assay Kit (Azo-Wax) 200 assays per kit K-AZOWAX 木聚糖酶试剂盒((Azo-Wax)
Xylanase Assay Kit (Xylazyme AX) 200 assays per kit K-XYLS 木聚糖酶试剂盒

Megazyme E-BSTAA α-淀粉酶 α-Amylase (Thermostable) (Bacillus sp.)

发表于由

Megazyme E-BSTAA α-淀粉酶 α-Amylase (Thermostable) (Bacillus sp.)

上海金畔生物代理Megazyme品牌试剂产品，欢迎新老客户访问Megazyme官网或者咨询我们获取更多相关产品信息。

α-Amylase (Thermostable) (Bacillus sp.)
Ask a Scientist

High purity α-Amylase (Thermostable) (Bacillus sp.) for use in research, biochemical enzyme assays and in vitro diagnostic analysis. This enzyme is exceptionally thermostable and is the ideal choice for use in the total starch assay kits (K-TSTA and K-TSHK). It is considerably more thermostable than related enzymes such as the heat stable α-amylase (Bacillus licheniformis, E-BLAAM). Please see the data sheet for experimental stability data.

EC 3.2.1.1
CAZy Family: GH13
CAS: 9000-90-2 / 9000-85-5

alpha-amylase; 4-alpha-D-glucan glucanohydrolase

Highly purified. From Bacillus sp.
In 50% (v/v) glycerol plus 0.02% sodium azide
For use in Megazyme Total Starch methods, suitable for use at pH 5 and above.
Supplied at ~ 3,000 U/mL.

Specific activity:
~ 170 U/mg (40oC, pH 6.5 on Ceralpha reagent).

Stability: > 4 years below -10oC.

DESCRIPTION

α-Amylase (Thermostable) (Bacillus sp.)

EC 3.2.1.1
CAZy Family: GH13
CAS: 9000-90-2 / 9000-85-5

Synonyms:
alpha-amylase; 4-alpha-D-glucan glucanohydrolase

Form:
In 50% (v/v) glycerol plus 0.02% sodium azide

Stability:
> 4 years below -10oC.

Specific activity:
~ 170 U/mg (40oC, pH 6.5 on Ceralpha reagent).

Unit definition:.
One Unit of α-amylase activity is defined as the amount of enzyme required to release one μmole of p-nitrophenol from blocked p-nitrophenyl-maltoheptaoside per minute (in the presence of excess α-glucosidase) at pH 6.5 and 40oC.

Specificity:
Hydrolysis of α-1,4 glucosidic linkages in linear α-1,4 glucan (e.g. amylose regions in starch).

Applications:
For use in Megazyme Total Starch assay kits (K-TSTA and K-TSHK).

图片仅供参考,请以实物为准。
正文中列出的所有试剂只能用于测试或研究，不能作为”药品”，”食品”，”家庭用品”等使用。
我司所销售的化学试剂、原料等所有产品（包括但不限于抗生素类、蛋白质类、试剂盒类产品等）仅限用于科学研究用途，不得作用于人体。

食品中膳食纤维检测用试剂盒及试剂

发表于由

食品中膳食纤维检测用试剂盒及试剂

在生命科学领域，上海金畔生物为业界提供了丰富的实验室和生物医药生产研发的产品。上海金畔生物代理Megazyme产品，欢迎新老客户访问Megazyme官网或者咨询我们获取更多相关Megazyme试品牌剂盒、酶标准品、糖酶片剂，呈色底物，多聚糖，低聚糖等产品信息。

Megazyme    K-TDFR    膳食纤维总量检测试剂盒    200 assays

Megazyme   E-BLAAM     α-淀粉酶液，CAS：9000-85-5   10/40/100mL-10,000U/mL (底物为可溶性淀粉)

Megazyme   E-BSPRT 蛋白酶液，CAS：9014-01-1    10/40/100mL- 浓度50mg/mL，350 U/mL

Megazyme    E-AMGDF   淀粉葡糖苷酶液，CAS：9032-08-0  10/40/100mL-3300U/mL（底物为可溶性淀粉）

Megazyme    G-CEL   硅藻土  100/500g

备注：酶均采用 AOAC 985.29，AOAC 991.43 和 AACC 32-05 推荐的标准，对 Megazymeα-淀粉酶，蛋白酶，淀粉葡糖甘酶的效力和纯度进行了评估，适用于食品中膳食纤维检测。

试剂盒中包含α-淀粉酶   E-BLAAM 20mL，蛋白酶   E-BSPRT 20 mL，淀粉葡糖苷酶   E-AMGDF  40mL，可检测200次。

1. 简介：

膳食纤维是指碳水化合物及其相类似物质的总和，包括多糖、寡糖、木质素以及相关的植物物质。主要有纤维素、半纤维素、果胶及亲水胶体物质，如树胶、海藻多糖等组分；另外还包括植物细胞壁中所含有的木质素；不被人体消化酶所分解的物质，如抗性淀粉、抗性糊精、抗性低聚糖、改性纤维素、黏质、寡糖以及少量相关成分，如蜡纸、角质、软木脂等。

总膳食纤维检测试剂盒是根据AOAC991.43，AOAC 985.29，AACC32-07和AACC 32-05方法开发的，也适用于其它方法，如AACC
Method 32-21，AACC method32-06。

2. 检测原理 

脱脂（如大于10%）干燥后的样品经热稳定a-淀FEN酶、蛋白酶和淀粉葡萄糖苷酶酶解消化，酶解液通过乙醇沉淀、过滤，乙醇和丙酮洗涤残渣后干燥、称重，得到总膳食纤维（TDF）残渣；

酶解液通过直接过滤、热水洗涤残渣，干燥后称重，得到不溶性膳食纤维（IDF）残渣；

滤液用乙醇沉淀，过滤、干燥、称重，得到可溶性膳食纤维（SDF）残渣。

TDF、IDF和SDF的残渣扣除蛋白质、灰分和空白即得TDF、IDF和SDF含量。

该检测试剂盒的主要优势在于直接提供高纯度的酶，酶的活力是标准化的，而标准化的a-淀FEN酶的活力在测量抗性淀粉是公认的。淀粉葡萄糖苷酶中基本没有纤维素酶，而其他常用的酶制剂中常含有这种污染物，这将导致溶解和低估β-葡聚糖。该试剂盒提供的酶都是稳定的液体，可以保存到试剂盒有效期，并且是直接应用液，不需要使用前再溶解。

3. 用途 

适用于检测谷物、水果、蔬菜和加工食品中的总膳食纤维（TDF）、不溶性

膳食纤维（IDF）和可溶性膳食纤维（SDF）的检测。

4. 提供试剂及材料 

每一个盒中的提供的酶试剂足够进行200个试验，如另外需要可单独订货：

4.1热稳定a-淀粉酶

4.2蛋白酶

4.3淀粉葡萄糖苷酶

5. 需要的设备和试剂

5.1 设备

A. 高型无导流口烧杯：400mL或600mL

B. 坩埚：具粗面烧结玻璃板，孔径40-60
μm。清洗后在马福炉中525℃灰化6小时或过夜，用真空泵除去硅藻土和灰分，室温下用2%清洗液浸泡1小时，用水和蒸馏水冲洗干净，用15
mL丙酮冲洗后风干，加1g硅藻土到干燥的坩埚中，在130℃干燥至恒重，在干燥器中冷却1小时，记下坩埚（包括硅藻土）的重量。

C. 真空溶剂过滤装置：真空泵或有调节装置的抽吸器，1L的抽滤瓶，侧壁有抽滤口，以及抽滤瓶配套的橡胶塞。用于酶解液的抽滤。

D. 恒温振荡水浴：95-100℃

E. 分析天平：感量0.1mg

F. 天平（台秤）：4 000g量程，感量0.1g

G. 马福炉：525±5°C，

H. 烘箱：103±2℃，130±3℃

I. 真空干燥箱

J. 干燥器：二氧化硅或等同干燥剂

K. PH计，具有温度补偿功能。

L. 微量凯氏定氮仪。

M. 移液器，50-200 μL，5 mL，一次性移液吸头。

N. 计时器。

O. 橡胶刮勺

P. 磁力搅拌器

5.2 试剂

A. 95%乙醇（体积比），

B. 78 %乙醇：取821mL95%乙醇置于容量瓶中，用水稀释到刻度，混匀。

C. 丙酮

D. 蒸馏水或去离子水

E. 清洗液Micro (International Products Corp.,Trenton,NJ).，配成2%液体

F. MES/TRIS缓冲液（0.05mol/L）:称取19.52g (MES) (Sigma, M 8250)和14.2 g

(TRIS) (Sigma,T1503)，用1.7L蒸馏水溶解，用6mol/L氢氧化钠调节PH至

8.2±0.1，加水稀释到2L（注意24℃时PH值为8.2，20℃时PH值为8.3，27-28℃

时PH值为8.1）

G. 盐酸溶液（0.561 mol/L）：取93.5mL 6 mol/L的盐酸，加入700mL水中，混匀

后用水定容到1L。

H. 氢氧化钠

I. PH值标准缓冲液：PH值为 4.0，7.0 和10.0。

6. 酶的纯化和标准化

6.1 根据AACC/AOAC的膳食纤维检测方法，必须确保酶的纯度。

6.1.1 淀粉葡萄糖苷酶被木聚糖酶、纤维素酶和果胶酶污染，会低估β-葡聚糖、

阿拉伯木聚糖和果胶的含量。

6.1.2 热稳定a-淀粉酶被污染，会影响抗性淀粉的测量。

6.1.3 蛋白酶被4-β-葡聚糖酶污染，会低估β-葡聚糖的含量。

6.1.4 如不是使用该的酶，请参考下面方法测定。

Test Sample

Activity Tested

Sample Wt（g）

Expected Recovery (%)

Citrus pectin

Pectinasea 『1』

0.1

90-95 『3』

?-Glucan (barley)

?-glucanase (cellulase) 『1』

0.1

95-100

Wheat starch

Amylase 『2』

1.0

0-1

Casein

Protease 『2』

0.3

0-2

High amylose starch

Amylase

1.0

~30 『4』

注解：

『1』：没有酶活力作用。

『2』：最大酶活力作用

『3』：除很少量的柑橘果胶全部沉淀

『4』：含有大量抗性淀粉，准确回收率的数值影响热稳定a-淀粉酶的使用量。

6.2 根据AACC/AOAC的膳食纤维检测方法，必须对酶标准化测定，如果不是使用该的酶，请按以下方法测定

6.2.1 淀粉葡萄糖苷酶，0.2 mL，

— 酶活力表示方法1：淀粉/葡萄糖酶-过氧化物酶法，3300 U/mL，1个酶活力单位定义为：40°C，PH值4.5时，每分钟释放1
μmol葡萄糖所需要的酶量。

— 酶活力表示方法2：对-硝基苯基-b-麦芽糖苷（PNPBM)法，200 U/mL，
1个酶活力单位（1PNP单位））定义为：40°C，有过量萄糖苷酶存在下，每分钟从对硝基苯基-β-麦芽糖苷释放1 μmol 对硝基苯基所需要的酶量。

6.2.2 热稳定a-淀粉酶，0.05 mL，

— 酶活力表示方法1：以淀粉为底物，以Nelson/Somogyi还原糖表示，10000U/mL
，1个酶活力单位定义为：40°C，PH值6.5时，每分钟释放1 μmol葡萄糖所需要的酶量。

— 酶活力表示方法2：对硝基苯基麦芽糖为底物，3,000 U/mL（Ceralpha），1个酶活力单位定义为：40°C，PH值6.5时，每分钟释放1
μmol对-硝基苯基所需要的酶量。

6.2.3 蛋白酶，0.10 mL

— 酶活力表示方法1：酪蛋白测试，350 U/mL或50 mg/mL或7 Tyrosine
U/mL，1个酶活力单位定义为：40°C，PH值8.0时，每分钟从可溶性酪蛋白中水解出（并溶于三氯乙酸）1 μmol酪氨酸所需要的酶量。

— 酶活力表示方法2：偶氮酪蛋白测试，350 U/mL或50 mg/mL或7 Tyrosine
U/mL，1个内肽酶活力单位定义为：40°C，PH值8.0时，每分钟从可溶性酪蛋白中水解出（并溶于三氯乙酸）1μmol酪氨酸所需要的酶量。该偶氮酪蛋白(货号：S-AZCAS).

7. 检测步骤

7.1 试样制备

准确称取双份试样各1 g，质量差小于0.005g，精确到0.1mg，置于400mL或600mL高型烧杯中，同时制备双份空白样，在每个烧杯中加入40 mL
PH值8.2的MES-TRIS缓冲液，磁力搅拌，直到试样完全分散到缓冲液中。

7.2 热稳定a-淀粉酶酶解：加入50
μL热稳定a-淀粉酶溶液，加盖铝箔，置于95-100°C恒温振荡水浴中持续振摇，当所有烧杯全部放入水浴开始计时，反应35分钟。

7.3 冷却：将烧杯取出玲却到60°C，除去铝箔盖，用刮勺将烧杯内壁和底部的胶状物刮下，用10 mL蒸馏水冲洗烧杯壁和刮勺。

7.4 蛋白酶酶解：在每个烧杯中各加入100
μL蛋白酶溶液，加盖铝箔，置于60°C恒振荡水浴中，当烧杯内温度达到60°C开始计时，持续反应30分钟。

7.5 PH值调节：反应30分钟后，边搅拌边加入0.561 mol/L盐酸，严格控制60°C，用 1mol/L氢氧化钠溶液或
1mol/L盐酸溶液，控制PH值在4.5±0.2。

7.6 淀粉葡萄糖苷酶酶解：在上述溶液中边搅拌边加入200
μL淀粉葡萄糖苷酶溶液，加盖铝箔，置于60°C恒温振荡水浴中，持续振摇，当烧杯内温度达到60°C开始计时，反应30分钟。

8. 测定

8.1 不溶性膳食纤维测定：

8.1.1
过滤洗涤：试样酶解液全部转移到坩埚中过滤，残渣用10mL预热到70°C的蒸馏水洗涤两次，合并过滤液，转移至另一600mL高脚烧杯中，备测可溶性膳食纤维。残渣分别用10mL
95%乙醇和丙酮洗涤两次，抽滤去除洗涤液，将坩埚连同残渣在103°C烘干过夜，将坩埚置于干燥器中冷却1小时，称重（包括坩埚、膳食纤维残渣和硅藻土），精确至0.1mg，减去坩埚和硅藻土的干重，计算残渣质量。

8.1.2
蛋白质和灰分测定：称完质量的残渣和硅藻土的混合物，一份用凯氏定氮法，以N×6.25为换算系数，计算蛋白质质量。另一份在525°C灰化5小时，于干燥器中冷却，精确称量坩埚总量（精确至0.1mg）减去坩埚和硅藻土干重，计算灰分质量。

8.2 可溶性膳食纤维测定

8.2.1 计算滤液体积：将不可溶性膳食纤维过滤后的滤液收集到600mL的高型烧杯中，通过烧杯+滤液总重扣除烧杯质量的方法估算滤液的体积。

8.2.2 沉淀：将滤液加入4倍体积预热60°C的95%乙醇，或取80g滤液加入320mL预热60°C的95%乙醇室温下沉淀1小时。

8.2.3 过滤：在干燥的坩埚中加入1g硅藻土，70°C真空干燥至恒重，记录坩埚的质量（精确到0.1mg）。用15mL
78%乙醇将硅藻土润湿，并用真空溶剂过滤装置在抽真空条件下，使硅藻土平铺于坩埚中。将样品酶解液缓慢转移至对应的坩埚中，抽滤。用刮勺和78%乙醇将所有残渣转至坩埚中。

8.2.4 洗涤：分别用15mL 78%乙醇、15mL
95%乙醇和15mL丙酮洗涤残渣各两次，抽滤去除洗涤液后，将坩埚连同残渣在105°C烘干过夜。将坩埚置于干燥器中冷却1小时，称重（包括坩埚、膳食纤维残渣和硅藻土），精确至0.1mg。减去坩埚和硅藻土的干重，计算残渣质量。

8.2.5
蛋白质和灰分测定：称完质量的残渣和硅藻土的混合物，一份用凯氏定氮法，以N×6.25为换算系数，计算蛋白质质量，另一份在525°C灰化5小时，于干燥器中冷却，精确称量坩埚总量（精确至0.1mg）减去坩埚和硅藻土干重，计算灰分质量。

8.3 总膳食纤维检测检测

8.3.1
沉淀：在每份试样中加入预热至60°C的95%乙醇225mL（预热后的体积，如乙醇的温度超过65°C，则加入228mL），乙醇与样液体积比为4：1，取出烧杯，盖上铝箔，室温下沉淀1小时。建议改为：称量酶解液的质量，用天平加入4倍质量的预热的60°C的95%乙醇，4°C冰箱中沉淀过夜。

8.3.2 过滤：在干燥的坩埚中加入1g硅藻土，70°C真空干燥至恒重，记录坩埚的质量（精确到0.1mg）。用15mL
78%乙醇将硅藻土润湿，并用真空溶剂过滤装置在抽真空条件下，使硅藻土平铺于坩埚中。将样品酶解液缓慢转移至对应的坩埚中，抽滤。用刮勺和78%乙醇将所有残渣转至坩埚中。

8.3.3 洗涤：分别用15mL 78%乙醇、15mL
95%乙醇和15mL丙酮洗涤残渣各两次，抽滤去除洗涤液后，将坩埚连同残渣在105°C烘干过夜。将坩埚置于干燥器中冷却1小时，称重（包括坩埚、膳食纤维残渣和硅藻土），精确至0.1mg。减去坩埚和硅藻土的干重，计算残渣质量。

8.3.4 蛋白质和灰分测定：称完质量的残渣和硅藻土的混合物，一份用凯氏定氮

法，以N×6.25为换算系数，计算蛋白质质量。，另一份在525°C灰化5小时，

于干燥器中冷却，精确称量坩埚总量（精确至0.1mg）减去坩埚和硅藻土

干重，计算灰分质量。

9. 计算：

DF（%）=『（R1+R2）/2-p-A-B』/『（M1+M2）/2』*100%式中：

DF=样品中膳食纤维含量（TDF、IDF、SDF），%

R1 和R2=双份样品残渣的质量，单位为毫克（mg）

m1 和m2=双份样品的质量，单位为毫克（mg）

A=灰分的质量，

P=蛋白的质量

B=空白=(BR1+BR2）/2-BP-BA

BR1 和BR2=双份试样空白残渣的质量

BP=试样空白蛋白的质量

BA=试样空白灰分的质量

可以使用该的计算软件Mega-CalcTM进行自动计算。

方法二

根据AACC method 32-05 和AOAC Method 985.29方法测定

1. 仪器设备和同方法一

2. 试剂和溶液

a. 280±2.0 mL 95 %乙醇

b．10±0.5 mL 78 %乙醇

c. 50±0.5 mL缓冲液

d. 磷酸盐缓冲液（0.08mol/L，PH值6.0）: 取1.400g Na2HPO4和9.68g NaH2PO4

溶解在700mL蒸馏水中，用水定容到1L，用PH计检查PH值。

e. 氢氧化钠溶液（0.275mol/L）：去11g氢氧化钠溶解在700mL蒸馏水中，冷却转

移到容量瓶中，用水定容到1L。

f. 盐酸溶液（0.325 mol/L）：取 325 mL 1.0 mol/L 盐酸置于容量瓶中，用水定容

到1L。

3. 样品准备

总膳食纤维的测定必须是低脂或无脂的干燥样品，取混匀后的样品于70°C真

空干燥过夜，干燥器中冷却，再称重记录重量损失，干样粉碎后过0.3-0.5 mm

筛，若试样不能加热，则冷冻干燥后再粉碎过筛。如果是高脂肪样品(> 10 %)，

取经过干燥的样品分别用25mL石油醚脱脂三次，干燥后记录脱脂的质量损失，

最后计算总膳食纤维含量时进行进行校正，粉碎过筛后的干燥试样放在干燥

器中待用。

4. 分析步骤

准确称取双份试样各1 g，质量差小于0.005g，精确到0.1mg，置于400mL或

600mL高型烧杯中，同时制备双份空白样，在每个烧杯中加入50 mL PH值6.0

的磷酸盐缓冲液，磁力搅拌，直到试样完全分散到缓冲液中，控制PH值6.0±0.1。

4.2 热稳定a-淀粉酶酶解：加入50 μL热稳定a-淀粉酶溶液，加盖铝箔，置于沸腾

水浴中15分钟，每5分钟轻轻振荡一次。当烧杯内的温度到100°C开始计时，

总共大约30分钟。

4.3 冷却：将烧杯取出冷却到室温，加入10 mL 0.275mol/L 的氢氧化钠，调节

PH值在7.5±0.1。

4.4 蛋白酶酶解：在每个烧杯中各加入100 μL蛋白酶溶液，加盖铝箔，置于60°C

恒振荡水浴中，当烧杯温度达到60°C开始计时，持续反应30分钟。

4.5 冷却：加入10 mL 0.325 mol/L盐酸，调节PH值在4.5±0.2。

4.6 淀粉葡萄糖苷酶酶解：在上述溶液中边搅拌边加入200 μL淀粉葡萄糖苷酶溶

液，加盖铝箔，置于60°C恒温振荡水浴中，持续振摇，当烧杯内温度达到60°C

开始计时，反应20分钟。

4.7 在每份试样中加入预热至60°C的95%乙醇280mL（预热前的体积），乙醇与样

液体积比为4：1，取出烧杯，盖上铝箔，室温下沉淀1小时。

4.8 过滤：在干燥的坩埚中加入1g硅藻土，70°C真空干燥至恒重，记录坩埚的质

量（精确到0.1mg）。用15mL 78%乙醇将硅藻土润湿，并用真空溶剂过滤装置

在抽真空条件下，使硅藻土平铺于坩埚中。将样品酶解液缓慢转移至对应的

坩埚中，抽滤。用刮勺和78%乙醇将所有残渣转至坩埚中。

4.9 洗涤：分别用20mL 78%乙醇洗涤3次、10mL 95%乙醇和10mL丙酮洗涤残渣

各两次，抽滤去除洗涤液后，将坩埚连同残渣在105°C烘干过夜或70°C真空

干燥过夜。将坩埚置于干燥器中冷却1小时，称重（包括坩埚、膳食纤维残渣

和硅藻土），精确至0.1mg。减去坩埚和硅藻土的干重，计算残渣质量。

4.10 蛋白质和灰分测定：称完质量的残渣和硅藻土的混合物，一份用凯氏定

氮法，以N×6.25为换算系数，计算蛋白质含量。另一份在525°C灰化5小时，

于干燥器中冷却，精确称量坩埚总量（精确至0.1mg）减去坩埚和硅藻土干重，

计算灰分质量。

计算：

未校正的平均空白残渣 (UABR)=平均试样空白残渣质量，单位为毫克

未校正空白蛋白残渣(BPR)=UABR x %空白蛋白/100

未校正空白灰分残渣(BAR)=UABR x %空白灰分/100

校正的空白(CB)= UABR – BPR – BAR

未校正的平均样品残渣 (USAR)=平均试样空白残渣质量，单位为毫克

未校正样品蛋白残渣(SPR)=UABR x %空白蛋白/100

未校正样品灰分残渣(SAR)=UABR x %空白灰分/100

校正的样品(CSR)= USAR-SPR-SAR-CB% TDF= 100 x CSR/样品质量mg最终的%
TDF是去除了和水分后的总膳食纤维含量。

10、参考文献：

1. Association of Official Analytical Chemists (1985). Official
Methods of Analysis, 14th ed., 1st suppl. Secs. 43,
A14-43,A20, p.399.

2. Association of Official Analytical Chemists (1986). Changes in methods.
J. Assoc. Off. Anal. Chem., 69:370.

3. Association of Official Analytical Chemists (1987). Changes in methods.
J. Assoc. Off. Anal. Chem., 70:393.

4. Prosky, L., Asp, N.-G., Furda, I., DeVries, J.W., Schweizer, T.F.and
Harland, B.F. (1985). Determination of total dietary fibre in foods and food
products: Collaborative study. J. Assoc. Off. Anal.Chem.,
68:677.

5. Prosky, L., Asp, N.-G., Schweizer, T.F., DeVries, J.W. and Furda,I.
(1988). Determination of insoluble, soluble, and total dietary fibre in

foods and food products. J. Assoc. Off. Anal. Chem.,
71:1017.16

Megazyme 其他活性酶Other Activities

发表于由

Megazyme 其他活性酶Other Activities

Acetyl-CoA synthetase (Bacillus subtilis) 250 Units E-ACSBS
Asparaginase (E. coli) 400 Units at 25oC E-ASNEC
Catalase (Aspergillus niger) 400,000 U at 25oC E-CATLQ
Citrate synthase (E. coli) 2,500 Units E-CITEC
Diaphorase (E. coli) 1,000 Units E-DIAEC
Glucose oxidase – Catalase Mixture (eukaryote) 2 vials – 200 tests E-GOXCA
Glutamate oxaloacetate transaminase (E. coli) 5,000 Units E-GOTEC
Glutamate pyruvate transaminase (Bacillus subtilis) (Recombinant) 2,500 Units E-GPTBS
Glutaminase (E. coli) 2,500 Units E-GLUTEC
Mutase (α-Phosphoglucomutase) (microbial) 3,000 Units E-PGM
Phosphotransacetylase (Bacillus subtilis) 3,000 Units E-PTABS
Protoplast F 2.5 mL E-PROTOF
α-Rhamnosidase (prokaryote) 3,000 Units at 50oC E-RHAMS
Succinyl-CoA synthetase (prokaryote) 550 Units E-SCOAS
Trehalase (prokaryote) 8,400 Units E-TREH